期刊简介
本刊是由沈阳药科大学主办，国内外公开发行的药学类科技期刊。设有药剂学、药物化学、药物分析学、药理学、中药研究、微生物与生物制药、医药经济、综述、研究快报等栏目。
往期目录
-
1999
-
2000
-
2001
-
2002
-
2003
-
2004
-
2005
-
2006
-
2007
-
2008
-
2009
-
2010
-
2011
-
2012
-
2013
-
2014
-
2015
-
2016
-
2017
-
2018
首页>沈阳药科大学学报杂志
- 杂志名称：沈阳药科大学学报杂志
- 主管单位：辽宁省教育厅
- 主办单位：沈阳药科大学
- 国际刊号：1006-2858
- 国内刊号：21-1349/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：期刊收录：国家图书馆馆藏, 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 知网收录(中)
EML4-ALK-G1202R点突变质粒及其体外稳转细胞系构建
宋惠玲；勾文峰；马玉花；翟鑫；吴英良；左代英
关键词：EML4-ALK-G1202R, 非小细胞肺癌, 融合PCR
摘要：目的 融合PCR法构建棘皮动物微管相关蛋白样4-间变性淋巴瘤激酶(echinoderm microtubule associated protein like 4-anaplastic lymphoma kinase,EML4-ALK)G1202R点突变载体,并构建体外克唑替尼耐药细胞模型.方法 利用RT-PCR从H2228细胞中获得EML4-ALK融合基因,随后利用融合PCR技术构建EML4-ALK-G1202R点突变融合基因,酶切后定向连入真核表达质粒pEGFP-N1中,构建pEGFP-N1-EML4-ALK-G1202R重组质粒.脂质体法将重组质粒转入A549细胞中,G418抗生素筛选构建EML4-ALK-G1202R稳定高表达细胞系.MTT法验证细胞模型对克唑替尼的耐受性.结果 测序结果表明EML4-ALK-G1202R点突变正确,Real time-PCR和Western blot检测结果表明稳转细胞系构建成功,MTT结果表明克唑替尼耐药模型构建成功.结论 成功构建了pEGFP-N1-EML4-ALK-G1202R真核表达载体,转染A549细胞后,可稳定表达并发挥克唑替尼耐药性,为进一步研究EML4-ALK点突变导致的细胞耐药机制奠定了基础.
友情链接