期刊简介
本刊是由沈阳药科大学主办，国内外公开发行的药学类科技期刊。设有药剂学、药物化学、药物分析学、药理学、中药研究、微生物与生物制药、医药经济、综述、研究快报等栏目。
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首页>沈阳药科大学学报杂志
- 杂志名称：沈阳药科大学学报杂志
- 主管单位：辽宁省教育厅
- 主办单位：沈阳药科大学
- 国际刊号：1006-2858
- 国内刊号：21-1349/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：期刊收录：国家图书馆馆藏, 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 知网收录(中)
表达载体pET22b-FGFR1的构建 及在大肠杆菌中表达
董媛；冯淳；马新宇；曹欢；郑诗卉；王会岩
关键词：成纤维细胞生长因子受体1胞外区, 乳糖诱导, 表达
摘要：目的 构建和表达人成纤维细胞生长因子受体l(fibroblast growth factor receptor,FGFR1)胞外区的基因工程菌,并对其表达条件进行优化.方法 以肝癌细胞HepG2为模板,利用反转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)扩增FGFR1胞外区,与载体pET22b连接后转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,用乳糖对其进行诱导,经SDS-PAGE电泳分析诱导剂的浓度、诱导时机、诱导时间及诱导的温度等对表达量的影响.结果 成功扩增出FGFR1胞外区片段,长度为600bp.经酶切和测序证实获得的FGFR1胞外区基因序列与预期一致,构建的载体pET22b-FGFR1成功表达FGFR1胞外区蛋白,蛋白表达量质量分数在20％以上,优表达条件为:当工程菌的A600的值为0.8时,终质量浓度为2.0 g·L-1的乳糖一次性添加,37℃诱导3h蛋白表达量达到大,Western blotting分析该表达产物可以和人FGFR1多克隆抗体特异性结合.结论 成功构建表达人FGFR1胞外区蛋白的基因工程菌,乳糖可以诱导FGFR1胞外区蛋白表达,为后续研究提供了良好基础.
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